Африканская чума свиней (АЧС) – смертельная опасная вирусная болезнь свиней и кабанов, которая приводит к значительным экономическим потерям. Несмотря на прогресс в изучении иммунопатологии при АЧС, на сегодняшний день создание универсальной эффективной и безопасной вакцины против вируса АЧС не увенчалось успехом. Это связано со сложной структурой вируса, высокой вариабельностью генома и наличием большого количества иммуномодулирующих белков. Как и в случае с другими крупными ДНК-вирусами, геном вируса АЧС кодирует несколько белков, которые способствуют уклонению вируса от иммунного ответа хозяина. Одним из них является мощный иммуносупрессор белок 5EL (ген A238L) – IkB гомолог и ингибитор кальций нейрин фосфатазы, вызывающий запрограммированную гибель клетки. Целью исследования явилось получение рекомбинантного вируса АЧС с делецией гена A238L методом гомологичной рекомбинации и изучение его репродукции in vitro. В результате из штамма вируса АЧС «Волгоград/14с» в перевиваемой культуре клеток COS-1 получен рекомбинантный вирус АЧС Волгоград/14с ΔA238L. Согласно результатам наших исследований, удаление гена A238L из вирулентного штамма Волгоград/14с не привело к изменению культуральных свойств рекомбинантного вируса Волгоград/14с ΔA238L в перевиваемой культуре клеток COS-1. Репродукция рекомбинантного штамма Волгоград/14с ΔA238L в первичной культуре клеток макрофагов свиней и культуре клеток COS-1 составляет 4,0-5,0 lg ГАЕ 50/см3. Различий в ЦПД и динамике репродукции исходного и рекомбинантного штаммов не отмечено. Показано, что репортерная флюоресценция гена EGFP наблюдается при разной множественности заражения (0,1 и 1), что свидетельствует об эффективной репликации вируса.
African swine fever (ASF) is a deadly and dangerous viral disease of pigs and wild boars, which leads to significant economic losses. Despite the progress in the study of immunopathology in ASF, the creation of a universal effective and safe vaccine against ASF virus has not been successful so far. This is due to the complex structure of the virus, the high variability of the genome and the presence of a large number of immunomodulating proteins. As is the case with other large DNA viruses, the ASF virus genome encodes several proteins that help the virus evade the host's immune response. One of them is the powerful immunosuppressant protein 5EL (A238L gene) - an IkB homolog and calcium neurin phosphatase inhibitor that causes programmed cell death. The aim of the study was to obtain a recombinant ASF virus with deletion of the A238L gene by homologous recombination and to study its reproduction in vitro. As a result, a recombinant Volgograd / 14c ΔA238L ASF virus was obtained from the strain of ASF virus «Volgograd / 14c» in the transplanted cell culture COS-1. According to the results of our studies, the removal of the A238L gene from the virulent Volgograd / 14c strain did not lead to a change in the cultural properties of the recombinant Volgograd / 14c ΔA238L virus in the transplanted cell culture COS-1. Reproduction of the recombinant strain Volgograd / 14c ΔA238L in primary culture of pigs macrophage cells and COS-1 cell culture is 4.0-5.0 lg GAE 50 / cm3. There were no differences in the the dynamics of reproduction of the initial and recombinant strains. It was shown that reporter fluorescence of the EGFP gene is observed at different multiplicity of infection (0.1 and 1), which indicates the effective replication of the virus
The authors declare that there are no conflicts of interest present.