Цель исследований: изучить эпизоотическую ситуацию по микоплазмозу крупного рогатого скота и свиней в хозяйствах Западно-Сибирского региона. Для этого провести комплексное обследование коров родильно-профилакторного периода и полученных от них больных телят, быков-производителей, свиноматок, поросят. Определить чувствительность и диагностическую ценность культурального метода индикации и идентификации микоплазм, а также РНИФ, РПИФ, РНГА при микоплазмозе и ассоциативных формах его проявления. Установить место локализации, структурный состав, пути выделения микроорганизмов и механизм заражения животных. Для прижизненной диагностики использовали в качестве биоматериала: бронхоальвеолярную слизь телят, полученную методом альвеолярного лаважа, сыворотку крови, слизь и кал с прямой кишки. От коров и свиноматок исследовали сыворотку крови, секрет вымени и урогенитального тракта. Применяли разработанные нами методы серологической диагностики (прямой и непрямой иммунофлуоресценции - РПИФ и РНИФ) для прижизненного и посмертного выявления антигенов и антител. Для бактериологического исследования на микоплазмоз использовали питательные среды, разработанные совместно с Омским НИИ природно- очаговых инфекций Роспотребнадзора. Предложенная нами схема индикации и идентифи кации микоплазм из биоматериала основана на комплексном подходе изучения ассоциативной формы микоплазмозной инфекции, легко выполнима в производственных и лабораторных условиях. С помощью серологического экспресс-метода (РНИФ) время диагностики сокращается до 60 мин, при выявлении микоплазмозного антигена. Наличие в организме антимикоплазмозных антител в сыворотке крови методом РНГА также можно обнаружить через 60 мин. после постановки реакции. Бактериологический анализ, который включает в себя не только индикацию, но и идентификацию микоплазм по расщеплению аргинина, глюкозы и мочевины на специальных питательных средах, а также выделение сопутствующей микрофлоры для изучения микст-форм течения инфекционного процесса, осуществим в течение одних - трех суток. С помощью данной методики можно правильно и своевременно диагностировать ассоциативный микоплазмоз, что необходимо практикующим ветеринарным специалистам для разработки эффективных методов профилактики и борьбы с этой инфекцией. Предложенный способ идентификации может использоваться для определения видовой характеристики выделенных культур с дальнейшим их применением в качестве антигенов серологических реакций, изготовлении вакцинных препаратов или для иммунизации лабораторных животных с целью получения лечебных или диагностических гипериммунных сывороток
The goal of the research is to examine epizootic situation of mycoplasmosis in bovine cattle and pigs of the West-Siberian farms. It required complex examination of cows during puerperal and postpartum period, their new-born infected calves, as well as stud bulls, sows, and piglets; assessment of sensitivity and diagnostic value of culture method for mycoplasmas indication and identification, as well as applicability of indirect immunofluorescence test (IIMT), direct immunofluorescence test (DIMT), and indirect hemagglutination test (IHAT) in case of mycoplasmosis and its associated forms. It also required determining localization, structural composition, shedding, and mechanisms of spreading of the infection. The following biological material was used for life-time diagnostics in calves: bronchoalveolar mucus extracted using alveolar lavage method; blood serum; mucus and feces from rectum. Blood serum, udder secretion, and urogenital tract secretion were tested in cows and sows. Life-time and postmortem detection of antigens and antibodies relied on domestically developed methods of serological diagnostics (direct and indirect immunofluorescence - DIMT and IIMT). Nutrient media developed in cooperation with the Omsk Scientific and Research Institute of Natural Focal Infections at Rospotrebnadzor were used in bacteriological tests for mycoplasmosis. The scheme we have proposed for mycoplasmas indication and identification in biological material is based upon comprehensive approach to examination of associated form of mycoplasmal infection, and convenient for both laboratory and industrial use. Serum-based express-method (IIMT) requires as little as 60 minutes to indicate mycoplasmal antigen. The same 60 minutes after reaction onset takes indication of anti-mycoplasmal antibodies in blood serum using IHAT technique. Bacteriological examination includes both mycoplasma indication and identification on the basis of metabolism of arginine, glucose, and urea on specific nutrient media, as well as isolating associated microflora for deeper examination of mixed forms of infection, and takes one to three days. This technique provides for accurate and timely diagnosis of associated mycoplasmosis which is required by veterinary practitioners to take effective measures for the infection prevention and treatment. Proposed method of identification may be used for identification of species of isolated culture to be further used as antigens for serological reactions, vaccine preparation, or immunization of laboratory animals and obtaining therapeutic and diagnostic hyperimmune serums
The authors declare that there are no conflicts of interest present.