РАЗРАБОТКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ НА ОСНОВЕ ПЦР ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ БАКТЕРИЙ РОДА WOLBACHIA У СОБАК С D.IMMMITIS
Abstract
Универсальность, высокая чувствительность и относительная простота исполнения ПЦР, а также отсутствие данных о распространенности бактерий рода Wolbachia у собак с D.immitis в Ростовской области, диктует актуальность разработки тест-системы на основе ПЦР для обнаружения этих бактерий у собак с дирофиляриозом и оценки ее специфичности. В результате проведенных исследований, нам удалось сконструировать видоспецифичные праймеры Wolb.F (5´ - ata-aca-gca-gga-atg-ggt-ggt - 3´) и Wolb.R (5´ - tca-cgc-act-cta-ttt-gct-gca - 3´), фланкирующие участок в 590 пар нуклеотидов, и определить оптимальные условия проведения ПЦР для обнаружения бактерий рода Wolbachia у собак с D.immmitis. Специфичность разработанной тест-системы была подтверждена путем сравнительного анализа результатов определения ДНК W. pipientis, полученных из периферической крови собак, с ДНК Borrelia burgdorferi, а также с ДНК, выделенной непосредственно от самок D.immitis.
About the Authors
Колодий
Северо Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт
Russian Federation
Russian Federation
Ключников
ветеринарная клиника «Вита»,
Russian Federation
Russian Federation
Аксенова
Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт
Russian Federation
Russian Federation
Алексей Ермаков
ДГТУ
Russian Federation
Russian Federation
References
1. McHaffie J. Dirofilaria immitis and Wolbachia pipientis: a thorough investigation of the symbiosis responsible for canine heartworm disease // Parasitology research. - 2012. - V. 110. - P. 499-502.
2. Kozek W.J., Gonzalez Jr., Amigo L.A. Mappe parasitologiche-8. Wolbachia of Dirofilaria immitis: an historical perspective and morphological characteristics. - Zagreb.: Giuseppe Cringoli, 2007.
3. Пьянова А. М., Василевич Ф. И. Значение эндосимбионта Wolbachia в развитии и диагностике дирофиляриоза // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. - №Ι1.- 2008. - С. 37-39.
4. Ястреб В. Б., Павлова Е. В. Эндосимбионт филярий бактерия Wolbachia и ее возможная роль в диагностике и лечении дирофиляриоза // Теория и практика паразитарных болезней животных. - 2010. - №. 11. - С.517-521.
5. Rossi M.I.D., Paiva J., Bendasc, A., Mendes-deAlmeida, F., Knackfuss, F., Miranda, M., Guerrero, J., Fernandes, O., Labarthea, N., Effects of doxycycline on the endosymbiont Wolbachia in Dirofilaria immitis (Leidy, 1856). Naturally infected dogs. Veterinary Parasitology. - 2010. - V. 174. - P. 119-123.
6. Fenn, K, Blaxter, M. Wolbachia genomes: revealing the biology of parasitism and mutualism. Trends in Parasitology. -2006. - V.22. - P. 61-65.
7. StrΙbing U., Lucius, R., Hoerauf, A., Pfarr, K.M. Mitochondrial genes for heme-dependent respiratory chain complexes are up-regulated after depletion of Wolbachia from filarial nematodes. International Journal for Parasitology. - 2010. - V. 40.
8. Taylor M.J., Cross H.F., Ford L., Makunde W.H., Prasad G.B.K.S., Bilo K. Wolbachia bacteria in filarial immunity and disease. // Parasite Immunol. - 2001. - V. 23. - P. 401-409.
9. Bazzocchi C., Genchi C., Paltrinieri S., Lecchi L., Mortarino M., Bandi C. Immunological role of the endosymbionts of Dirofilaria immitis: the Wolbachia surface protein activates canine neutrophils with production of IL-8. // Vet Parasitol. - 2003. - V.117. - P.73-83.
10. Morchon R., Ferreira A.C., Martin-Pacho J., Montoya A., Mortarino M., Genchi C., Simon F. Specific IgG antibody response against antigens of Dirofilaria immitis and its Wolbachia endosymbiont bacterium in cats with natural and experimental infections. // Vet Parasitol. - 2004. - V.125. - P. 313-321.
Review
For citations:
, , , . Russian Journal of Veterinary Pathology. 2016;(3):71-83. (In Russ.)
Views:
63
Email this article 