МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К ВИРУСУ БЕШЕНСТВА
Аннотация
Гибридомы, секретирующие моноклональные антитела (МАт) к вирусу бешенства (ВБ), получа-
ли путем гибридизации спленоцитов BALB\c мышей, иммунизированных вакцинным штаммом ВБ
ВНИИЗЖ, с клетками мышиной миеломы линии NSO/1. Свойства полученных МАт изучали в ре-
акциях непрямой иммунофлуоресценции и твердофазного сэндвич-ИФА с использованием разных
штаммов и полевых изолятов ВБ, а также в реакции нейтрализации ВБ на культуре клеток ВНК-21.
В результате проведенных исследований отобрали три клона, продуцирующие Мат, специфичные к
гликопротеину, и один клон, секретирующий МАт к рибонуклеопротеину ВБ (ВНИИЗЖ/N-1). МАт
ВНИИЗЖ/G-1, специфичные к гликопротеину ВБ, обладали вируснейтрализующей активностью и
реагировали с ВБ только вакцинных штаммов. МАт ВНИИЗЖ/N-1 выявляли скопления рибонук-
леопротеина ВБ в клетках головного мозга животных, павших от бешенства, в реакции иммунофлу-
оресценции и реагировали с разными штаммами и полевыми изолятами ВБ.
ли путем гибридизации спленоцитов BALB\c мышей, иммунизированных вакцинным штаммом ВБ
ВНИИЗЖ, с клетками мышиной миеломы линии NSO/1. Свойства полученных МАт изучали в ре-
акциях непрямой иммунофлуоресценции и твердофазного сэндвич-ИФА с использованием разных
штаммов и полевых изолятов ВБ, а также в реакции нейтрализации ВБ на культуре клеток ВНК-21.
В результате проведенных исследований отобрали три клона, продуцирующие Мат, специфичные к
гликопротеину, и один клон, секретирующий МАт к рибонуклеопротеину ВБ (ВНИИЗЖ/N-1). МАт
ВНИИЗЖ/G-1, специфичные к гликопротеину ВБ, обладали вируснейтрализующей активностью и
реагировали с ВБ только вакцинных штаммов. МАт ВНИИЗЖ/N-1 выявляли скопления рибонук-
леопротеина ВБ в клетках головного мозга животных, павших от бешенства, в реакции иммунофлу-
оресценции и реагировали с разными штаммами и полевыми изолятами ВБ.
Об авторах
А. В. МолодкинРоссия
С. Г. Аббасова
Филиал института биоорганической химии РАН, г. Пущино Московской
области
Россия
Россия
Н. А. Назаров
Россия
Н. В. Балохина
Филиал института биоорганической химии РАН, г. Пущино Московской
области
Россия
Россия
В. С. Васильева
Филиал института биоорганической химии РАН, г. Пущино Московской
области
Россия
Россия
Х. М. Бозиев
Филиал института биоорганической химии РАН, г. Пущино Московской
области
Россия
Россия
Ф. А. Бровко
Филиал института биоорганической химии РАН, г. Пущино Московской
области
Россия
Россия
К. Н. Груздев
Россия
С. С. Рыбаков
Россия
Список литературы
1. С.В. Грибенча, О.В. Василенко, В.А. Кузьмицкая и др. Взаимодействие моноклональных антител к структурным белкам вакцинного вируса Внуково-32 с другими вирусами группы бешенства // Вопр. вирусол. 1991. № 5. С. 399-402.
2. Н.А. Назаров, А.Е. Метлин, С.С. Рыбаков. Сравнительная характеристика антител, полученных на разные антигены вируса бешенства // Биол.- экол. пробл. заразных бол. диких ж-ных и их роль в патологии с.-х. ж-ных и людей: матер. Междунар. науч.-практ.-конф. окров, 2002. С. 168-170.
3. В.В. Недосеков, И.Ф. Вишняков, И.В. Никишин. Получение и использование иммуноасцитической жидкости, специфичной к вирусу бешенства // Пробл. инфекц. патологии с.-х. ж-ных: тез. докл. конф. Владимир, 1997. С. 182-183.
4. С.В. Грибенча, О.В. Василенко, В.А. Фуралев и др. Получение и характеристика гибридом, продуцирующих моноклональные антитела к струк- турным белкам вируса бешенства, штамм Внуково-32 // Вопр. вирусол. 1991. № 4. С. 318-321.
5. В.В. Недосеков, А.А. Стрижаков, А.Д. Середа,
6. Т.Р. Кирюхина. Получение и характеристика моноклональных антител к структурным белкам вируса бешенства штамм ТС-80 // Доклады РАСХН. 1999. № 4. С. 38-40.
7. А.П. Пономарев, Н.А. Назаров, С.С. Рыбаков и др. Совершенствование метода очистки и концентрирования вируса бешенства // Нейроинфекции: бешенство, губкообразная энцефалопатия КРС, Крейтцфельдта-Якоба и др. прионные болезни; листериоз, болезнь Ауески, болезнь Тешена: матер.Междунар.конф. Покров, 2001. С.49-50
8. J.D. Beatty, B.G. Beatty, W.G. Vlahos. Measurement of monoclonal antibody affinity by non-competitive enzyme immunoassay // J. Immunol. Methods. 1987. V. 100. P. 173-179.
9. P.L. Ey, S.J. Prowse, C.R. Leukin. Isolation of pure IgG1, IgG2a and IgG2b immunoglobulins from mouse serum using protein A-Sepharose // Mol. Immunol. 1978. V. 15. P. 429-436.
10. G. Kцhler, C. Milstein. Continuos cultures of fused cell secreting antibody of predefined specificity // Nature. 1975. V. 256. P. 495-497.
11. U. K. Laemlii. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. V. 227, N 5259. P. 680-685.
12. A.E. Metlin, J. Cox, S.S. Rybacov et al. Monoclonal antibody characterization of rabies virus isolates from Russia, Finland and Estonia // J. Vet. Med. 2004. V. 51. P. 94-96.
13. W.E. Marissen, R.A. Kramer, A. Rice et al. Novel rabies virus-neutralizing epitope recognized by human monoclonal antibody: fine mapping and escape mutant analysis // J. Virol. 2005. V. 79, N 8. P. 4672-4678.
14. P. Perrin. Techniques for the preparation of rabies conjugates // Laboratory techniques in rabies. 4th ed. Geneva, 1996. P. 433-444.
15. O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Randall. Protein measurement with Folin phenol reagent // J. Biol. Chemistry. 1951. V. 193. P. 265-275.
16. J.S. Smith, A.A. King. Monoclonal antibodies for the identification of rabies and non-rabies lyssaviruses // Laboratory techniques in rabies. - 4th ed. - Geneva, 1996. - P. 145-156.
17. C.V. Trimarchi, R.D. Rudd, M. Safford. An vitro virus neutralization test for rabies antibodi // Laboratory techniques in rabies. 4th ed. Geneva, 1996. P. 145-156.
Рецензия
Для цитирования:
Молодкин А.В., Аббасова С.Г., Назаров Н.А., Балохина Н.В., Васильева В.С., Бозиев Х.М., Бровко Ф.А., Груздев К.Н., Рыбаков С.С. МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА К ВИРУСУ БЕШЕНСТВА. Ветеринарная патология. 2006;(4):152-160.
Просмотров:
45
Послать статью по эл. почте 