ИЗУЧЕНИЕ ПОТЕНЦИАЛА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ НАНОЧАСТИЦ СЕЛЕНА В КАЧЕСТВЕ НОСИТЕЛЕЙ ДЛЯ АНТИГЕНА ВИРУСА ЯЩУРА

Ящур - острое высоко-контагиозное инфекционное заболевание домашних и диких парнокопытных животных, которое может передаваться человеку. Существующие вакцины во многих случаях не вполне эффективны. Целью настоящего исследования была оценка возможности использования наночастиц селена в качестве носителя антигена и адъюванта. Для оценки иммуногенных свойств наночастиц селена был синтезирован конъюгат наночастиц селена с синтетическим пептидом белка VP1 капсида вируса ящура. В качестве антигена для иммунизации использовали лиофилизированный коммерческий синтетический пептид 135-159 белка VP1 капсида вируса ящура (Cytokine, Russia). Пептид содержал 25 аминокислотных остатков. В качестве контроля использовали коммерческую противоящурную вакцину: «Вакцина противоящурная культуральная эмульгированная инактивированная» (ARRIAH, Russia). В экспериментах были использованы морские свинки-альбиносы самцы, массой к началу эксперимента 300-350 г, количество - 15 голов. Для проведения иммунобиологичсеких исследований было сформировано по принципу аналогов 3 группы животных, по 3 головы в каждой. Животные были распределены по группам с использованием в качестве основного критерия массы тела. Полученным конъюгатом, а также коммерческой вакциной иммунизировали морских свинок. Иммунизацию животных проводили подкожно вдоль позвоночного столба в 10 точек, двукратно, с интервалом 10 дней. После завершения иммунизации определяли титр и чувствительность полученных антител. Установлено, что конъюгат наночастиц селена с синтетическим пептидом белка VP1 капсида вируса ящура в смеси с CFA индуцируют значительно более выраженный иммунный ответ, что проявлялось в значительно более высоком титре получаемых антител. При этом процесс биосинтеза антител сопровождался значительным увеличением продукции провоспалительных цитокинов (особенно интерферона-γ) и стимуляцией дыхательной активности перитонеальных макрофагов.

вирус ящура, синтетические пептидные вакцины, наночастица селена, адъювант

1. Petrie H.T. Selenium and the immune response: 2. Enhancement of murine cytotoxic T-lymphocyte and natural killer cell cytotoxicity in vivo / H.T. Petrie, L.W. Klassen, P.S. Klassen, J.R. O’Dell, H.D. Kay // J. Leukoc. Biol. - 1989. - Vol. 45. - P. 215-220.

2. Sordillo L.M. Nutritional strategies to optimize dairy cattle immunity / L.M. Sordillo // J. Dairy Sci. - 2016. - Vol. 99. - P. 1-16.

3. Dykman L.A. Use of a synthetic foot-andmouth disease virus peptide conjugated to gold nanoparticles for enhancing immunological response / L.A. Dykman, S.A. Staroverov, P.V. Mezhenny, A.S. Fomin, S.V. Kozlov, A.A. Volkov, V.N. Laskavy, S.Yu. Shchyogolev // Gold Bulletin. - 2015. - Т. 47. - №3. - С. 25.

4. Козлов С.В. Конструирование коллоидного комплекса селена с лактоферрином и изучение его биодинамических свойств / С.В. Козлов [и др.] // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2012. - №1. - С. 27-32.

5. Исаева А.Ю. Уточнение некоторых биодинамических параметров комплекса коллоидного селена конъюгированного с лактоферрином in vitro / А.Ю. Исаева, С.А. Староверов, А.А. Волков, А.М. Субботин, С.В. Козлов // Ученые записки учреждения образования «Витебская ордена «Знак почета» государственная академия ветеринарной медицины». - 2012. - Т. 48. - №2-2. - С. 223-225

6. Martinez-Salas E. Foot-and-Mouth Disease Virus / E. Martinez-Salas, M. Saiz, F. Sobrino // In: Animal Viruses: Molecular Biology / Eds. T.C. Mettenleiter, F. Sobrino. - Norfolk: Caister Academic Press, 2008. - P. 1-38.

7. Doel T.R. Natural and vaccine-induced immunity to foot and mouth disease: the prospects for improved vaccines / T.R. Doel // Rev. Sci. Tech. - 1996. - Vol. 15. - P. 883-911.

8. Bittle J.L. Protection against foot-and-mouth disease by immunization with a chemically synthesized peptidepredicted from the viral nucleotide sequence / J.L. Bittle, R.A. Houghten, H. Alexander, T.M. Shinnick, J.G. Sutcliffe, R.A. Lerner, D.J. Rowlands, F. Brown // Nature. - 1982. - Vol. 298. - P. 30-33.

9. Lowry O.H. Protein measurement with the Folin phenol reagent / O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Randall // J. Biol. Chem. - 1951. - Vol. 193. - P. 265-275.

10. Leiter E.H. The NOD mouse: a model for insulin dependent diabetes mellitus / E.H. Leiter // Current Protocols in Immunology. V. 3. / Coligan J.E., Kruisbeek A.M., Margulies D.H., Shevach E.M., Strober W. -New York: John Wiley & Sons, 2001. P. 15.9.1-15.9.23.

11. Bernas T. The role of plasma membrane in bioreduction of two tetrazolium salts, MTT and CTC / T. Bernas, J.W. Dobrucki // Arch. Biochem. Biophys. - 2000. - Vol. 380. - P. 108-116.

12. Guliy O.I.. Effect of sulphanilamides on the electrophysical properties of microbial cells / O.I. Guliy, V.D. Bunin, O.V. Ignatov et al. // Anti-Infective Agents. - 2014. - Т. 12. - №2. - P. 191-197.