Субхроническая токсичность инсектоакарицидного средства на основе D-цифенотрина, пиперонилбутоксида и пирипроксифена при наружном применении у яичных цыплят

Введение. Разработка безопасных и эффективных инсектоакарицидных средств для одновременной дезакаризации и дезинсекции животноводческих и птицеводческих объектов является важным направлением современной паразитологии. Например, в промышленном птицеводстве широко распространен красный куриный клещ  [1–3]. Эти временные эктопаразиты-гематофаги заселяют труднодоступные места клеточного оборудования, стыки, трещины и т. д. При паразитологическом обследовании птичников на одном погонном метре обнаруживают около 100–500 клещей, при этом в организме яичных кур отмечают многочисленные негативные изменения центральных обменных процессов, развитие оксидативного стресса, выраженного анемического синдрома, гипоксии смешанного типа [4], потерю пера, истощение, беспокойство, снижение яйценоскости [5].

В 2024 г. во Всероссийском научно-исследовательском институте фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений (ВНИИП – филиал ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН, г. Москва) был разработан лекарственный препарат на основе трех компонентов, малотоксичныхдля птиц, по мнению ученых [6–8]. Первый компонент — синтетический пиретроид D-цифенотрин, обладающий активным действием в отношении пухоедов, аргазид, иксодид и красных куриных клещей [9–10]. Второй компонент — пиперонилбутоксид из группы синергистов пиретроидов. Третьим веществом является пирипроксифен — супрессор эмбриогенеза эктопаразитов. Данная комбинация трех компонентов относится к 3 классу опасности (вещества умеренно опасные) при пероральном использовании и к 4 классу опасности (вещества малоопасные) — при наружном применении [11]. Следует отметить, что пиретроиды менее токсичны для птиц, чем для млекопитающих, что обусловлено высокой скоростью биотрансформации пиретроидов в организме птиц по сравнению с млекопитающими [12–14].

Внедрение новых лекарственных препаратов в ветеринарную практику — сложный процесс, требующий многочисленных и всесторонних доклинических исследований, подтверждающих их безопасность и эффективность. Одним из наиболее важных исследований является изучение токсических эффектов при многократном применении препарата на целевых видах животных. Цель данной статьи — изучить субхроническую токсичность инсектоакарицидного средства на основе D-цифенотрина, пиперонилбутоксида и пирипроксифена и его влияние на организм яичных цыплят при наружном применении.

Материалы и методы. Эксперимент проводили в 2024 г. на Подольской опытно-производственной базе ВНИИП – филиала ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН (г. Москва). 15 цыплят кросса Хайсекс Уайт в возрасте 30 суток были разделены на три группы (две опытные и одна контрольная) по пять голов в каждой. Кормили птицу полнорационным комбикормом для соответствующего возраста. Доступ к воде ограничивали цыплятам из двух опытных групп только во время обработок. Птицу содержали в двухъярусных клетках: контрольную группу разместили на верхнем ярусе, на нижнем раздельно содержали цыплят из первой и второй опытных групп.

Эксперимент проводили согласно руководству по проведению доклинических исследований лекарственных средств, выпущенному в 2012 г. под редакцией А.Н. Миронова¹. Режим дозирования и кратность введения выбраны с целью выявления возможных
токсических эффектов на организм птиц при использовании 0,005 %-ной водной эмульсии исследуемого препарата в течение длительного срока, а также при его передозировке. Водная эмульсия исследуемого препарата предназначена для противопаразитарных обработок птицеводческого помещения в присутствии кур. При этом препарат распыляют мелкокапельно с использованием различных технических средств, двукратно с интервалом 5 суток и более. Согласно инструкции по применению расход водной эмульсии препарата составляет 50 мл/м², условно за терапевтическую дозу приняли 10,0 мл на 0,3 кг массы тела птицы.

Предварительно перед каждой обработкой 5,0 %-ный препарат разводили водой в соотношении 1:1000 и получали его 0,005 %-ную водную эмульсию. В первой опытной группе птиц обрабатывали мелкокапельным опрыскиванием в дозе 33,3 мл/кг с помощью помпового опрыскивателя. Во второй опытной группе терапевтическую дозу увеличивали втрое (100,0 мл/кг). Перед каждой обработкой проводили индивидуальное взвешивание цыплят, после чего рассчитывали необходимую дозу препарата. Птиц из контрольной группы не обрабатывали.

Обработки водной эмульсией лекарственного препарата проводили 6 раз с интервалом 48 ч. Птиц из трех групп взвешивали, измеряли температуру тела и отбирали у них пробы крови до обработок, на следующий день после 6-й обработки и через 10 суток после 6-й обработки. В пробах крови определяли комплекс гематологических и биохимических показателей согласно общепринятым методикам [15]. Ежедневно вели наблюдение за поведением цыплят, их двигательной активностью, внешним видом, потреблением корма и воды.

Статистическую обработку цифровых данных проводили, используя критерий Стьюдента, с помощью программы Microsoft Excel 2016. Результаты считали статистически значимыми (достоверными), если значение уровня значимости (P) было меньше 0,05. Результаты статистической обработки данных представлены в следующем формате: среднее значение (М) указано вместе с ошибкой среднего (± m).

Результаты исследования. В течение всего эксперимента ни один цыпленок не погиб. Во время обработок особи из первой и второй опытных групп забивались в угол клетки или активно передвигались по ней с чрезмерной вокализацией. Прием корма и воды у цыплят из опытных групп не отличался от контроля.

Динамика изменения массы тела цыплят представлена в таблице 1. Достоверные изменения массы тела у птиц из двух опытных групп отсутствовали. Кроме того, статистически значимых изменений не выявлено при анализе температуры тела у цыплят в течение всего эксперимента по сравнению с контролем (таблица 2).

Статистически значимые изменения выявлены у цыплят из второй опытной группы при анализе некоторых гематологических и биохимических показателей крови по сравнению с контролем. У яичных цыплят оценивали в крови количество эритроцитов, лейкоцитов и концентрацию гемоглобина (таблица 3). Известно, что циансодержащие пиретроиды, в т. ч.
D-цифенотрин, активно влияют на кроветворение  [16]. Так, у особей из второй опытной группы после 6-й обработки выявлена тенденция к снижению количества эритроцитов на 7,1 % по сравнению с контролем. При этом через 10 суток после последней обработки указанная тенденция по данному показателю отсутствовала. Также у цыплят из второй опытной группы выявлено статистически значимое снижение концентрации гемоглобина на 10,0 % (Р<0,05) по сравнению с контролем. Через 10 суток достоверных изменений по этому показателю не выявлено. Подобные результаты отражены в работе, исследующей изменения гематологических показателей крови лабораторных животных на фоне применения цифенотринсодержащего препарата [16].

Все пиретроиды, содержащие цианогруппу, нарушают транспортную функцию эритроцитов. Причем компенсаторные механизмы сначала обеспечивают нормальный уровень эритроцитов в крови, посредством стимуляции синтеза эритропоэтина, однако через некоторое время фиксируют угасание гемопоэза [16]. Кроме того, в работе A. Khan и др. отмечено угнетающее действие синтетических пиретроидов на эритропоэтин [17]. Заявленное обуславливает снижение интенсивности некоторых обменных процессов у цыплят на фоне многократного применения комбинированного препарата, что отражено в таблице 4.

На фоне 6-кратного применения трехкомпонентного средства у цыплят из второй опытной группы в крови установлено достоверное снижение концентрации общего белка на 9,1 % (Р<0,05) и глобулинов на 10,8 % (Р<0,05), а также тенденция к снижению уровня альбуминов на 7,4 % по сравнению с контролем. Это свидетельствует о нарушении белково-синтетической функции печени у цыплят из второй опытной группы и не противоречит другим исследованиям [17, 18]. Однако через 10 суток после применения комбинированного инсектоакарицида выявленные статистически значимые изменения отсутствовали, что свидетельствует о восстановлении у птиц функциональной активности печени в отношении синтеза белка. Подобное отмечено в работе коллег [19]. Известно, что основным органом-мишенью для пиперонилбутоксида является печень [20]. В исследованиях, проведенных на лабораторных животных, отмечено увеличение массы этого органа, повышение активности некоторых ферментов крови, ассоциированных с патологиями печени [21]. Однако во многих работах подтверждена безопасность пиперонилбутоксида для птиц, так как даже при использовании его в высоких дозах гибели животных не наблюдается [7, 21].

В результате многократного наружного применения препарата у цыплят из второй опытной группы отмечено снижение интенсивности процессов переаминирования, что выразилось в достоверном снижении активности аспартатаминотрансферазы на 8,7 % (Р<0,05), а также установлена тенденция к снижению активности аланинаминотрансферазы на 15,5 % по сравнению с контролем. Современное представление о диагностической значимости этих ферментов изложено в работе А.С. Шидловского и А.И. Салтанова, в которой отмечена тенденция к нарушению реализации взаимосвязей между углеводным, аминокислотным и энергетическим обменами на фоне низкой активности аминотрансфераз [22]. Через 10 суток после окончания обработок достоверных изменений между группами по активности этих ферментов не выявлено.

В течение эксперимента достоверных изменений концентрации креатинина в крови цыплят из двух опытных групп не выявлено по сравнению с контролем. Известно, что одной из причин снижения активности креатинфосфокиназы является дестабилизация аэробных процессов окисления в организме животных. Так, на следующий день после 6-й обработки у цыплят из первой опытной группы установлена тенденция к снижению активности указанного фермента на 7,9 %, а у птиц из второй опытной группы —достоверное снижение его активности на 20,8 % (Р<0,05) по сравнению с контролем. Однако через 10 суток после последнего использования препарата данные изменения отсутствовали. Возможно, это является следствием нормализации
интенсивности энергетического обмена в организме птиц на фоне стабилизации параметров красной крови.

Анализ некоторых показателей липидного обмена не выявил статистически значимых изменений концентрации триглицеридов и холестерола в крови цыплят из второй опытной группы по отношению к контролю.

Достоверных изменений концентрации глюкозы в крови цыплят не выявлено, при этом ее уровень у всех экспериментальных животных находился в пределах физиологической нормы (11-15 ммоль/л) [23]. Наряду с этим у цыплят из второй опытной группы в крови после 6-й обработки отмечалось две тенденции: снижение концентрации глюкозы на 3,8 % и активности α-амилазы на 3,3 % по сравнению с контролем. Через 10 суток достоверных изменений по показателям углеводно-энергетического обмена у цыплят не выявлено.

Таким образом, у цыплят из второй опытной группы на фоне 6-кратного наружного применения препарата выявлены дестабилизация показателей системы красной крови и снижение интенсивности белкового обмена, однако указанные изменения носили обратимый характер. Следовательно, дозу 100,0 мл/кг можно считать пороговой, а 33,3 мл/кг — недействующей (безопасной).

Обсуждение и заключение. Результаты исследования свидетельствуют о том, что новый комбинированный препарат на основе D-цифенотрина, пиперонилбутоксида и пирипроксифена безопасен для яичных цыплят в широком диапазоне доз при наружном применении, так как статистически значимые изменения некоторых показателей крови были выявлены только у цыплят из второй опытной группы, которым применяли средство в дозе 100,0 мл/кг, и даже эти изменения носили обратимый характер. Таким образом, есть основания полагать, что использование 0,005 %-ной водной эмульсии комбинированного препарата в дозе 33,3 мл/кг для дезакаризации помещений (двукратно с интервалом от 5 суток и более) в присутствии птиц можно считать безопасным.